ฟอสฟาเตสอัลคาไลน์ (ALP)
คำอธิบาย
อัลคาไลน์ฟอสฟาเตสได้มาจากสายพันธุ์รีคอมบิแนนท์ อี. โคไล ที่มียีน TAB5เอนไซม์เร่งปฏิกิริยาดีฟอสโฟรีเลชั่นที่ปลาย 5′ และ 3′ ของ DNA และ RNA phosphomonoestersนอกจากนี้ยังไฮโดรไลซิสไรโบสรวมถึงดีออกซีไรโบนิวคลีโอไซด์ไตรฟอสเฟต (NTP และ dNTP)TAB5 อัลคาไลน์ฟอสฟาเตสทำหน้าที่กับส่วนที่ยื่นออกมา 5′, 5′ ที่ปิดภาคเรียนและปลายทื่อฟอสฟาเตสสามารถนำมาใช้ในการใช้งานด้านอณูชีววิทยาได้หลายอย่าง เช่น การโคลนหรือการติดฉลากปลายโพรบเพื่อกำจัดปลายฟอสโฟรีเลชั่นของ DNA หรือ RNAในการทดลองโคลนนิ่ง ดีฟอสโฟรีเลชั่นจะป้องกันดีเอ็นเอพลาสมิดเชิงเส้นจากการรวมตัวด้วยตนเองนอกจากนี้ยังสามารถลดระดับ dNTP ที่ไม่ได้จดทะเบียนในปฏิกิริยา PCR เพื่อเตรียมเทมเพลตสำหรับการจัดลำดับ DNAเอนไซม์จะถูกปิดใช้งานอย่างสมบูรณ์และไม่สามารถย้อนกลับได้โดยการให้ความร้อนที่ 70°C เป็นเวลา 5 นาที ดังนั้นจึงทำให้การกำจัดฟอสฟาเตสออกก่อนที่จะทำการผูกหรือการติดฉลากปิดท้ายโดยไม่จำเป็น
การใช้งาน
1.อัลคาไลน์ฟอสฟาเตสควบคู่กับโปรตีน (แอนติบอดี สเตรปตะวิดิน ฯลฯ) สามารถระบุโมเลกุลเป้าหมายโดยเฉพาะ และสามารถนำมาใช้ในการตรวจจับ ELISA, WB และฮิสโตเคมี
2. อัลคาไลน์ฟอสฟาเตสสามารถใช้เพื่อลดฟอสฟอรัสที่ 5 '-terminal ของ DNA หรือ RNA เพื่อป้องกันการเชื่อมโยงในตัวเอง
3. DNA หรือ RNA ที่ถูกดีฟอสโฟรีเลชั่นข้างต้นสามารถติดฉลากด้วยฟอสเฟตที่มีฉลากวิทยุ (ผ่าน T4 poly-nucleotide kinase)
โครงสร้างทางเคมี
ข้อมูลจำเพาะ
รายการทดสอบ | ข้อมูลจำเพาะ |
กิจกรรมของเอนไซม์ | 5U/ไมโครลิตร |
กิจกรรมเอนโดนิวคลีเอส | ตรวจไม่พบ |
กิจกรรมเอ็กโซนูคลีส | ตรวจไม่พบ |
กิจกรรมนิคกิ้ง | ตรวจไม่พบ |
กิจกรรมอาร์เนส | ตรวจไม่พบ |
อี.โคไล ดีเอ็นเอ | ≤1สำเนา/5U |
เอนโดท็อกซิน | การทดสอบ LAL, ≤10EU/มก |
ความบริสุทธิ์ | ≥95% |
การขนส่งและการเก็บรักษา
การขนส่ง:สิ่งแวดล้อม
พื้นที่จัดเก็บ :เก็บที่อุณหภูมิ 2-8°C
แนะนำให้ทดสอบใหม่ชีวิต:2 ปี