อัลตร้านิวเคลียส
UltraNuclease เป็นเอนโดนูเคลสที่ดัดแปลงพันธุกรรมที่ได้มาจาก Serratia marcescens ซึ่งสามารถย่อยสลาย DNA หรือ RNA ไม่ว่าจะเป็นเกลียวคู่หรือเดี่ยว เชิงเส้นหรือเป็นวงกลมภายใต้สภาวะที่หลากหลาย สามารถย่อยสลายกรดนิวคลีอิกโดยสิ้นเชิงให้เป็นโอลิโกนิวคลีโอไทด์ 5'-โมโนฟอสเฟตที่มีความยาว 3-5 เบส .หลังจากการดัดแปลงทางพันธุวิศวกรรม ผลิตภัณฑ์จะถูกหมัก แสดงออก และทำให้บริสุทธิ์ใน Escherichia coli (E. coli) ซึ่งจะช่วยลดความหนืดของส่วนเหนือตะกอนของเซลล์และการวิจัยทางปัญญาของเซลล์ lysate แต่ยังปรับปรุงประสิทธิภาพการทำให้บริสุทธิ์และการวิจัยเชิงหน้าที่ของโปรตีนอีกด้วยนอกจากนี้ยังสามารถใช้ในการบำบัดด้วยยีน การทำให้ไวรัสบริสุทธิ์ การผลิตวัคซีน โปรตีนและอุตสาหกรรมยาโพลีแซ็กคาไรด์เป็นสารกำจัดกรดนิวคลีอิกที่ตกค้างในโฮสต์
คุณสมบัติของสินค้า
| หมายเลข CAS | 9025-65-4 |
| หมายเลขอีซี | |
| น้ำหนักโมเลกุล | 30kDa |
| จุดไอโซอิเล็กทริก | 6.85 |
| ความบริสุทธิ์ของโปรตีน | ≥99% ( SDS-PAGE และ SEC-HPLC ) |
| กิจกรรมเฉพาะ | ≥1.1×106U/มก |
| อุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุด | 37°ซ |
| ค่า pH ที่เหมาะสม | 8.0 |
| โปรตีเอสกิจกรรม | เชิงลบ |
| ภาระทางชีวภาพ | <10CFU/100,000U |
| โปรตีนเซลล์โฮสต์ที่เหลือ | ≤10ppm |
| โลหะหนัก | ≤10ppm |
| แบคทีเรียเอนโดท็อกซิน | <0.25EU/1000U |
| บัฟเฟอร์การจัดเก็บ | 20 มิลลิโมลาร์ ทริส-HCl, pH 8.0, 2 มิลลิโมลาร์ MgCl2 , 20 มิลลิโมลาร์ โซเดียมคลอไรด์ กลีเซอรอล 50% |
สภาพการเก็บรักษา
การขนส่ง ≤0°C; -25~-15°C การจัดเก็บ อายุการใช้งาน 2 ปี (หลีกเลี่ยงการละลายน้ำแข็ง)
คำจำกัดความของหน่วย
ปริมาณของเอนไซม์ที่ใช้ในการเปลี่ยนค่าการดูดซึมของ △A260 1.0 ภายใน 30 นาทีที่ 37 °C, pH 8.0 ซึ่งเทียบเท่ากับ DNA อสุจิปลาแซลมอน 37μg ที่ย่อยโดยการตัดเป็นโอลิโกนิวคลีโอไทด์ ถูกกำหนดให้เป็นหน่วยที่ทำงานอยู่ (U)
ควบคุมคุณภาพ
โปรตีนเซลล์โฮสต์ที่เหลือ: ชุดเอลิซ่า
-โปรตีเอส สารตกค้าง: 250KU/mL UltraNucease ทำปฏิกิริยากับซับสเตรตเป็นเวลา 60 นาที ตรวจไม่พบกิจกรรมใดๆ
-แบคทีเรียเอนโดท็อกซิน: LAL-Test, Pharmacopoeia of the People 's Republic of China Volume 4 (2020 Edition) วิธีทดสอบขีดจำกัดของเจลกฎทั่วไป (1143)
-ภาระทางชีวภาพ: เภสัชตำรับของสาธารณรัฐประชาชนจีน เล่มที่ 4 (ฉบับปี 2020)— ทั่วไป
กฎสำหรับการทดสอบความเป็นหมัน (1101), มาตรฐานแห่งชาติของ PRC, GB 4789.2-2016
-โลหะหนัก:ICP-AES, HJ776-2015
การดำเนินการ
กิจกรรมของ UltraNucease ถูกยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญเมื่อความเข้มข้นของ SDS มากกว่า 0.1% หรือ EDTA
ความเข้มข้นมากกว่า 1 มิลลิโมลาร์ สารลดแรงตึงผิว Triton X- 100, Tween 20 และ Tween 80 ไม่มีผลต่อนิวคลีเอส
คุณสมบัติเมื่อความเข้มข้นต่ำกว่า 1.5%
| การดำเนินการ | การดำเนินงานที่เหมาะสมที่สุด | การดำเนินการที่ถูกต้อง |
| อุณหภูมิ | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2+ | 1-2 มม | 1- 15 มม |
| ดีทีที | 0- 100 มม | >100มม |
| 2-เมอร์แคปโตเอทานอล | 0- 100 มม | >100มม |
| ไอออนโลหะโมโนวาเลนต์ （นา+, K+ ฯลฯ） | 0-20 มม | 0-200 มม |
| PO43- | 0- 10 มม | 0- 100 มม |
การใช้และปริมาณ
• กำจัดกรดนิวคลีอิกภายนอกออกจากผลิตภัณฑ์วัคซีน ลดความเสี่ยงของความเป็นพิษของกรดนิวคลีอิกที่ตกค้าง และปรับปรุงความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์
• ลดความหนืดของของเหลวป้อนที่เกิดจากกรดนิวคลีอิก ลดระยะเวลาการประมวลผลและเพิ่มผลผลิตโปรตีน
• กำจัดกรดนิวคลีอิกที่ห่อหุ้มอนุภาค (ไวรัส ตัวรวม ฯลฯ) ซึ่งเอื้ออำนวย
เพื่อการปลดปล่อยและการทำให้อนุภาคบริสุทธิ์
| ประเภทการทดลอง | การผลิตโปรตีน | ไวรัสวัคซีน | ยาเซลล์ |
| หมายเลขเซลล์ | น้ำหนักเซลล์เปียก 1 กรัม (แขวนลอยใหม่ด้วยบัฟเฟอร์ 10 มล.) | การหมัก 1 ลิตร ส่วนลอยเหนือของเหลว | วัฒนธรรม 1 ลิตร |
| ปริมาณขั้นต่ำ | 250U | 100U | 100U |
| ปริมาณที่แนะนำ | 2500U | 25000U | 5,000U |
• การบำบัดนิวคลีเอสสามารถปรับปรุงความละเอียดและการฟื้นตัวของตัวอย่างสำหรับคอลัมน์โครมาโตกราฟี อิเล็กโตรโฟเรซิส และการวิเคราะห์ซับ
• ในการบำบัดด้วยยีน กรดนิวคลีอิกจะถูกกำจัดออกเพื่อให้ได้ไวรัสที่เกี่ยวข้องกับอะดีโนบริสุทธิ์
