สารยับยั้ง Rnase (ปราศจากกลีเซอรอล)
สารยับยั้ง Murine RNase เป็นตัวยับยั้ง RNase ของ murine ชนิดรีคอมบิแนนท์ที่แสดงออกและทำให้บริสุทธิ์จาก E.coliโดยจับกับ RNase A, B หรือ C ในอัตราส่วน 1:1 ผ่านพันธะที่ไม่ใช่โควาเลนต์ จึงยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ทั้งสามและปกป้อง RNA จากการย่อยสลายอย่างไรก็ตาม ไม่มีผลกับ RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H หรือ RNase จาก Aspergillusสารยับยั้ง Murine RNase ได้รับการทดสอบโดย RT-PCR, RT-qPCR และ IVT mRNA และเข้ากันได้กับ Reverse transcriptases เชิงพาณิชย์ DNA polymerases และ RNA polymerases
เมื่อเปรียบเทียบกับสารยับยั้ง RNase ของมนุษย์ สารยับยั้ง RNase ของ murine ไม่มีซีสเตอีนสองตัวที่มีความไวสูงต่อการเกิดออกซิเดชัน ซึ่งทำให้สารยับยั้งหยุดทำงานทำให้มีความคงตัวที่ความเข้มข้น DTT ต่ำ (น้อยกว่า 1 mM)คุณลักษณะนี้ทำให้เหมาะสำหรับใช้ในปฏิกิริยาที่ DTT ที่มีความเข้มข้นสูงส่งผลเสียต่อปฏิกิริยา (เช่น RT-PCR แบบเรียลไทม์)
Aใบสมัคร
ผลิตภัณฑ์นี้สามารถนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการทดลองใดๆ ก็ตามที่อาจเกิดการรบกวนของ RNase ได้เพื่อหลีกเลี่ยงการเสื่อมสลายของ RNA เช่น:
1. การสังเคราะห์ cDNA เส้นแรก, RT-PCR, RT-qPCR ฯลฯ
2. ปกป้อง RNA จากการย่อยสลายในการถอดรหัส/การแปลภายนอกร่างกาย (เช่น การจำลองแบบของไวรัส ในหลอดทดลอง)
3. การยับยั้งกิจกรรม RNase ระหว่างการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของ RNA
สภาพการเก็บรักษา
เก็บที่อุณหภูมิ -25~-15℃;
รอบการละลายน้ำแข็ง ≤ 5 ครั้ง;
มีอายุ 1 ปี
คำจำกัดความของหน่วย
หนึ่งหน่วยถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของสารยับยั้ง RNase ที่จำเป็นในการยับยั้งการทำงานของ RNase A 5 ng 50%
น้ำหนักโมเลกุล
สารยับยั้ง RNase (ปราศจากกลีเซอรอล) คือโปรตีน 50 kDa
ควบคุมคุณภาพ
เอ็กโซนิวคลีเอส กิจกรรม:
การฟักตัวของเอนไซม์ 40 U พร้อมด้วย DNA ย่อย 1 μg γ-Hind III เป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37°C ส่งผลให้ตรวจไม่พบการย่อยสลายของ DNA ตามที่กำหนดโดยเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส
กิจกรรมเอนโดนิวคลีเอส:
การบ่มเอนไซม์ 40 U ด้วย 1 μg แล DNA เป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37°C ส่งผลให้ตรวจไม่พบการย่อยสลายของ DNA ตามที่กำหนดโดยเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส
นิค กิจกรรม:
การฟักตัวของเอนไซม์ 40 U ด้วย 1 μg pBR322 เป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37°C ส่งผลให้ตรวจไม่พบการย่อยสลายของ DNA ตามที่กำหนดโดยเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส
อาร์เนส กิจกรรม:
การฟักตัวของเอนไซม์ 40 U ด้วย 1.6 μg MS2 RNA เป็นเวลา 4 ชั่วโมงที่ 37 ℃ ส่งผลให้ตรวจไม่พบการย่อยสลายของ RNA ตามที่กำหนดโดยเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส
E.โคไลดีเอ็นเอ:
TaqMan qPCR ตรวจพบเอนไซม์ 40 UDNA ของเชื้อ E.coli มีค่า ≤ 0. 1pg/40U
Nโอเต้s
1.อย่าเขย่าหรือคนอย่างรุนแรงเพื่อป้องกันการทำงานของเอนไซม์
2.ตัวยับยั้ง RNase ทำงานที่อุณหภูมิตั้งแต่ 25°C ถึง 55°C และปิดใช้งานที่ ≥65°C
3. กิจกรรมของ RNase H, RNase 1 และ RNase T1 ไม่ถูกยับยั้ง
4. ช่วง pH สำหรับการยับยั้งการทำงานของ RNase กว้าง (ทำงานที่ pH 5-9) แสดงกิจกรรมสูงสุดที่ pH 7-8
