มัลติเพล็กซ์ RT-qPCR พรีมิกซ์ขั้นตอนเดียว
คำอธิบาย
หมายเลขแมว: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix คือชุด PCR เชิงปริมาณแบบมัลติเพล็กซ์ที่ใช้ RNA เป็นเทมเพลตในการทดลอง การถอดรหัสแบบย้อนกลับและ PCR เชิงปริมาณจะดำเนินการในหลอดปฏิกิริยาเดียวกัน ทำให้การดำเนินการทดลองง่ายขึ้น และลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนการออกแบบส่วนผสมบัฟเฟอร์และเอนไซม์ที่เป็นเอกลักษณ์สามารถใช้ในระบบไลโอฟิไลซ์ในขั้นตอนเดียวชุดอุปกรณ์นี้ใช้ Reverse Transcriptase ที่ทนความร้อนเพื่อการสังเคราะห์ cDNA สายแรกที่มีประสิทธิภาพโดยใช้ hotstart Taq DNA Polymerase สำหรับการขยายเชิงปริมาณประกอบด้วยบัฟเฟอร์ปฏิกิริยาที่ปรับให้เหมาะสม การผสมของเอนไซม์ ฯลฯ และปัจจัยที่ยับยั้งการขยาย PCR ที่ไม่เฉพาะเจาะจงอย่างมีประสิทธิภาพ และเพิ่มประสิทธิภาพการขยายของปฏิกิริยา qPCR หลายรายการ ทำให้เกิดการขยายเชิงปริมาณฟลูออเรสเซนซ์หลายรายการ ในขณะเดียวกันก็รับประกันประสิทธิภาพการขยายของไพรเมอร์
ส่วนประกอบ
| ชื่อ |
| 1. ไลโอ-บัฟเฟอร์ |
| 2. ไลโอ-เอนไซม์มิกซ์ |
| 3. สารป้องกันไลโอ |
สภาพการขนส่งไอออน
A: Lyo-buffer และตัวป้องกัน: -25~-15℃ อายุการเก็บรักษาคือ 1 ปี
B: ผสมเอนไซม์ไลโอ 2-8 ℃ อายุการเก็บรักษา 6 เดือน
คำแนะนำในการดำเนินงาน
1. ระบบปฏิกิริยา (ใช้ 25μL เป็นตัวอย่าง)
| ส่วนประกอบ | ปริมาณ (ไมโครลิตร) | ความเข้มข้นสุดท้าย |
| Lyo-บัฟเฟอร์ | 6 | 1* |
| ไลโอ-เอนไซม์มิกซ์ | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| ไพรเมอร์มิกซ์ (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| โพรบผสม (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| เทมเพลตอาร์เอ็นเอ | 5 | - |
| ดีพีซี H2O | มากถึง 25 | - |
2. โปรโตคอลการปั่นจักรยานที่ปรับให้เหมาะสม
1) โปรโตคอลการปั่นจักรยานมาตรฐาน
| ขั้นตอนปฏิกิริยา | อุณหภูมิ | เวลา | วงจร | |
| 1 | การถอดเสียงแบบย้อนกลับ | 50°ซa | 10 นาที | 1 |
| 2 | การเสียสภาพเบื้องต้น | 95°ซ | 5 นาที | 1 |
| 3 | ปฏิกิริยาการขยาย | 95°ซ | 15 วินาที | 45 รอบ |
| 60°ซb | 30วินาทีc |
2) โปรโตคอลการปั่นจักรยานเร็ว
|
| ขั้นตอนปฏิกิริยา | อุณหภูมิ | เวลา | วงจร |
| 1 | การถอดเสียงแบบย้อนกลับ | 50°ซa | 2 นาที | 1 |
| 2 | การเสียสภาพเบื้องต้น | 95°ซ | 2 วินาที | 1 |
| 3 | ปฏิกิริยาการขยาย | 95°ซ | 1 วินาที |
45 รอบ |
| 60°ซb | 13วินาทีc |
บันทึก:
a) ย้อนกลับ การถอดเสียง: สามารถเลือกอุณหภูมิได้ 42°C หรือ 50°C เป็นเวลา 10-15 นาที
b) ปฏิกิริยาการขยาย: อุณหภูมิจะถูกปรับตามค่า Tm ของไพรเมอร์ที่ออกแบบ
ค)เรืองแสง สัญญาณ การเข้าซื้อกิจการ: โปรดกำหนดขั้นตอนการทดลองให้เป็นไปตามข้อกำหนดของคู่มือเครื่องมือ
ข้อมูลทางเทคนิค/ข้อมูลจำเพาะ
| เริ่มร้อนแรง | สตาร์ทร้อนในตัว |
| วิธีการตรวจจับ | การตรวจจับไพรเมอร์โพรบ |
| วิธีพีซีอาร์ | RT-qPCR ขั้นตอนเดียว |
| ประเภทของตัวอย่าง | อาร์เอ็นเอ |
หมายเหตุ
1. ผลิตภัณฑ์นี้ใช้สำหรับการวิจัยเท่านั้น
2. โปรดสวมอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคล เช่น เสื้อกาวน์และถุงมือ เพื่อสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ！
