Robustart Taq DNA Polymerase

Robustart Taq DNA Polymerase เป็น DNA polymerase ที่เริ่มต้นอย่างรวดเร็วผลิตภัณฑ์นี้ไม่เพียงแต่สามารถยับยั้งปฏิกิริยาที่ไม่เฉพาะเจาะจงที่เกิดจากการหลอมไพรเมอร์หรือการรวมตัวของไพรเมอร์แบบไม่เฉพาะเจาะจงได้ดีขึ้นในกระบวนการเตรียมและขยายระบบ PCRดังนั้นจึงมีความจำเพาะที่ดีเยี่ยมและมีประสิทธิภาพมากกว่าในการขยายเทมเพลตที่มีความเข้มข้นต่ำ และเหมาะสำหรับปฏิกิริยาการขยาย PCR แบบมัลติเพล็กซ์นอกจากนี้ ผลิตภัณฑ์นี้มีความสามารถในการนำไปใช้งานที่ดีมาก และสามารถได้ผลลัพธ์การขยายที่เสถียรในปฏิกิริยา PCR ประเภทต่างๆ

ส่วนประกอบ

1.5 U/μL Robustart Taq DNA โพลีเมอเรส

2.10 × PCR Buffer II (ไม่มี Mg²+) (อุปกรณ์เสริม)

3.MgCl 25 มิลลิโมลาร์₂(ไม่จำเป็น)

* 10 × PCR Buffer II (ฟรี Mg²+) ไม่มี dNTP และ Mg²+ โปรดเพิ่ม dNTP และ MgCl₂เมื่อเตรียมระบบปฏิกิริยา

การใช้งานที่แนะนำ

1.ขยายเสียงอย่างรวดเร็ว

2.การขยายเสียงหลายรายการ

3.การขยายเลือด สำลี และตัวอย่างอื่นๆ โดยตรง

4.การตรวจหาโรคระบบทางเดินหายใจ

สภาพการเก็บรักษา

-20°C สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ควรผสมให้เข้ากันก่อนใช้งาน หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายบ่อยๆ

*หากเกิดฝนตกหลังจากการแช่เย็นถือว่าเป็นเรื่องปกติแนะนำให้ปรับให้สมดุลกับอุณหภูมิห้องก่อนผสมและใช้งาน

คำจำกัดความของหน่วย

หน่วยแอคทีฟหนึ่งหน่วย (U) หมายถึงปริมาณของเอนไซม์ที่รวมดีออกซีไรโบนิวคลีโอไทด์ 10 นาโนโมลเข้าไปในวัสดุที่ไม่ละลายกรดที่อุณหภูมิ 74°C เป็นเวลา 30 นาที โดยใช้ DNA อสุจิปลาแซลมอนที่ถูกกระตุ้นเป็นเทมเพลต/ไพรเมอร์

ควบคุมคุณภาพ

1.ความบริสุทธิ์ของอิเล็กโตรโฟเรติก SDS-PAGE มากกว่า 98%

2.ความไวในการขยาย การควบคุมแบบแบตช์ต่อแบตช์ ความเสถียร

3.ไม่มีกิจกรรมของนิวคลีเอสจากภายนอก ไม่มีการปนเปื้อนของเอนโดนิวคลีเอสหรือเอ็กโซนิวคลีเอสจากภายนอก

คำแนะนำ

การตั้งค่าปฏิกิริยา

หมายเหตุ:

1) ก.บัฟเฟอร์ไม่มี dNTP และ Mg²+ โปรดเพิ่ม dNTP และ MgCl₂เมื่อเตรียมระบบปฏิกิริยา

2)ข.หากใช้สำหรับ qPCR/qRT-PCR ควรเพิ่มโพรบฟลูออเรสเซนต์ลงในระบบปฏิกิริยาโดยปกติแล้วความเข้มข้นของไพรเมอร์ขั้นสุดท้ายที่ 0.2 μM จะให้ผลลัพธ์ที่ดีหากประสิทธิภาพของปฏิกิริยาไม่ดี ความเข้มข้นของไพรเมอร์สามารถปรับได้ในช่วง 0.2-1 μMโดยทั่วไปความเข้มข้นของโพรบจะถูกปรับให้เหมาะสมในช่วง 0.1-0.3 μMการทดลองไล่ระดับความเข้มข้นสามารถทำได้เพื่อค้นหาส่วนผสมที่ดีที่สุดของไพรเมอร์และโพรบ

โปรโตคอลการหมุนเวียนความร้อน

หมายเหตุ

1.อัตราการขยายของ DNA polymerase เร็วไม่ควรน้อยกว่า 1 kb/10 sอัตราการเพิ่มและลดลงของอุณหภูมิ โหมดควบคุมอุณหภูมิ และประสิทธิภาพการนำความร้อนของเครื่องมือ PCR ต่างๆ นั้นแตกต่างกันอย่างมาก ดังนั้นจึงขอแนะนำให้ปรับสภาวะปฏิกิริยาที่เหมาะสมที่สุดสำหรับเครื่องมือ PCR แบบเร็วเฉพาะ

2.ระบบนี้สามารถปรับเปลี่ยนได้สูง โดยมีความจำเพาะและความไวสูงกว่า

3.เหมาะสำหรับใช้เป็นรีเอเจนต์การตรวจจับ PCR ความไวสูง และสามารถนำมาใช้ในปฏิกิริยาการขยาย PCR แบบมัลติเพล็กซ์

4.กิจกรรมของโพลีเมอเรส 5 ′→ 3′, กิจกรรม exonuclease 5 ′→ 3′;ไม่มีกิจกรรม exonuclease 3 ′→ 5′;ไม่มีฟังก์ชันพิสูจน์อักษร

5.เหมาะสำหรับการทดสอบ PCR และ RT-PCR ในเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณ

6.จุดสิ้นสุด 3′ ของผลิตภัณฑ์ PCR คือ A ซึ่งสามารถโคลนเป็นเวกเตอร์ T ได้โดยตรง

7.แนะนำให้ใช้วิธีสามขั้นตอนสำหรับไพรเมอร์ที่มีอุณหภูมิการอบอ่อนต่ำ หรือสำหรับการขยายชิ้นส่วนที่มีความยาวมากกว่า 200 bp