RT-LAMP คัลเลอร์เมตริกมาสเตอร์มิกซ์ HCB5204A
ผลิตภัณฑ์นี้ประกอบด้วยบัฟเฟอร์ปฏิกิริยา, ผสม RT-Enzymes (Bst DNA polymerase และ transcriptase ย้อนกลับทนความร้อน), สารป้องกันไลโอฟิไลซ์ และส่วนประกอบของสีย้อมโครโมเจนิกวิธีใช้เพียงใช้ Buffer ผสมเอนไซม์ปฏิกิริยาและไพรเมอร์แล้วเติมลงในเทมเพลตการเพิ่มสารป้องกันไลโอฟิไลซ์สามารถทำได้โดยตรงมันเชื่อมต่อกับเครื่องไลโอฟิไลเซอร์และไลโอฟิไลซ์ และมีเพียงไพรเมอร์และเทมเพลตเท่านั้นที่ถูกเพิ่มเมื่อใช้ชุดนี้ให้การตรวจจับการขยายภาพที่รวดเร็วและชัดเจน ซึ่งปฏิกิริยาเชิงลบจะแสดงเป็นสีแดง และปฏิกิริยาเชิงบวกจะแสดงโดยการเปลี่ยนเป็นสีเหลือง
ส่วนประกอบ
| ส่วนประกอบ | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| บัฟเฟอร์การขยายแบบวนรอบ (พร้อมสีย้อม) | 0.96 มล | 4.80 มล.×2 | 9.60 มล.×10 |
| RT-เอนไซม์มิกซ์ | 270 ไมโครลิตร | 2.70 มล | 2.70 มล.×10 |
| สารป้องกันไลโอฟิไลซ์ | 0.96 มล.×2 | 9.60 มล.×2 | 9.60 มล.×20 |
การใช้งาน
สำหรับการขยายอุณหภูมิแบบไอโซเทอร์มอลของ DNA หรือ RNA
สภาพการเก็บรักษา
ขนส่งด้วยน้ำแข็งแห้ง เก็บไว้ที่อุณหภูมิ -25~ -15°Cหลีกเลี่ยงการละลายน้ำแข็งบ่อยๆ สินค้ามีอายุ 12 เดือน
มาตรการ
1.ละลายบัฟเฟอร์ปฏิกิริยาที่จะใช้ที่อุณหภูมิห้องวอร์เท็กซ์เป็นเวลาสั้นๆ หรือกลับด้านหลอดหลายๆ ครั้งเพื่อผสมให้เข้ากัน จากนั้นปั่นแยกเพื่อเก็บของเหลวไว้ที่ด้านล่างของหลอด
2.การเตรียมระบบปฏิกิริยารีเอเจนต์นี้สามารถเตรียมได้ในระบบปฏิกิริยาสองระบบ คือ การผสมปฏิกิริยาของเหลวและการผสมของระบบไลโอฟิไลซ์
1) เตรียมส่วนผสมปฏิกิริยาของเหลว
| ส่วนประกอบ | ปริมาณ |
| บัฟเฟอร์การขยายแบบวนรอบ (พร้อมสีย้อม) | 10 ไมโครลิตร |
| RT-เอนไซม์มิกซ์ | 2.8 ไมโครลิตร |
| 10 × ไพรเมอร์ผสมa | 5 ไมโครลิตร |
| เทมเพลต DNA/ RNA b | × ไมโครลิตร |
| น้ำที่ปราศจากนิวเคลียร์ | มากถึง 50 ไมโครลิตร |
2) การผสมระบบไลโอฟิไลเซชัน
1. เตรียมส่วนผสมที่แช่เยือกแข็งไว้
| ส่วนประกอบ | ปริมาณ |
| บัฟเฟอร์การขยายแบบวนรอบ (พร้อมสีย้อม) | 10 ไมโครลิตร |
| สารป้องกันไลโอฟิไลซ์ | 20 ไมโครลิตร |
| RT-เอนไซม์มิกซ์ | 2.8 ไมโครลิตร |
| น้ำที่ปราศจากนิวเคลียร์ | มากถึง 50 ไมโครลิตร |
2 การไลโอฟิไลเซชัน: ส่วนผสมที่เตรียมไว้ถูกไลโอฟิไลซ์ในระบบ 50ไมโครลิตร
3. เตรียมส่วนผสมปฏิกิริยา
| ส่วนประกอบ | ปริมาณ |
| ส่วนผสมไลโอฟิไลซ์ | 1 ชิ้น |
| 10 × ไพรเมอร์ผสมa | 5 ไมโครลิตร |
| เทมเพลต DNA/ RNA b | × ไมโครลิตร |
| น้ำที่ปราศจากนิวเคลียร์ | มากถึง 50 ไมโครลิตร |
หมายเหตุ:
1) ก.10×ไพรเมอร์ผสม : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM ลูป F/B;
2)ข.แนะนำให้ใช้ DEPC (ละลายน้ำได้) สำหรับกรดนิวคลีอิก
1.ฟักที่อุณหภูมิ 65°C เป็นเวลา 30-45 นาที ซึ่งสามารถขยายได้อย่างเหมาะสมตามเวลาปฏิกิริยาการเปลี่ยนสี
2.เมื่อดูด้วยตาเปล่า สีเหลืองคือค่าบวก และสีแดงคือค่าลบ
หมายเหตุ
1.เกลืออาจปรากฏที่ด้านล่างของหลอดบัฟเฟอร์ กระแสน้ำวนเป็นเวลาสั้นๆ หรือกลับด้านหลอดหลายครั้งเพื่อผสมให้เข้ากันที่อุณหภูมิห้อง
2.อุณหภูมิของปฏิกิริยาสามารถปรับให้เหมาะสมระหว่าง 62 ℃ ถึง 68 ℃ ตามเงื่อนไขของไพรเมอร์
3.รีเอเจนต์ที่บรรจุไว้ไม่ควรสัมผัสกับอากาศเป็นเวลานาน
4.ปฏิกิริยาการเปลี่ยนสีสีแดงและสีเหลืองขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนแปลง pH ของระบบปฏิกิริยา โปรดอย่าใช้สารละลายจัดเก็บกรดนิวคลีอิก Tris ที่ประกอบด้วย แนะนำให้ใช้ ddH2O กรดนิวคลีอิกที่เก็บไว้;
5.การทดลองควรได้มาตรฐาน รวมถึงการเตรียมระบบปฏิกิริยา การทำไลโอฟิไลเซชัน การประมวลผลตัวอย่างและกระบวนการเพิ่มตัวอย่าง
6.เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อน แนะนำให้เตรียมระบบปฏิกิริยาในแท่นที่สะอาดเป็นพิเศษ ในส่วนอื่นๆ เพิ่มเทมเพลตลงในตู้ดูดควันของห้องเพื่อหลีกเลี่ยงการรบกวนเชิงบวกที่ผิดพลาด
