Warm Start Bst 2.0 DNA Polymerase (ปราศจากกลีเซอรอล)

Bst DNA polymerase V2 มาจาก Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I ซึ่งมีกิจกรรม DNA polymerase 5 ′→ 3′ และกิจกรรมการแทนที่สายโซ่ที่แข็งแกร่ง แต่ไม่มีกิจกรรม exonuclease 5 ′→ 3′Bst DNA Polymerase V2 เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเปลี่ยนตำแหน่งของเกลียว, LAMP การขยายอุณหภูมิความร้อนคงที่ (การขยายความร้อนใต้อุณหภูมิแบบพึ่งสื่อกลางแบบลูป) และการหาลำดับอย่างรวดเร็วBst DNA polymerase V2 เป็นเวอร์ชันเริ่มต้นที่ร้อนแรงโดยใช้ Bst DNA polymerase V2 (HC5005A) ที่ได้รับจากเทคโนโลยีการปรับเปลี่ยนแบบพลิกกลับได้ ซึ่งสามารถยับยั้งการทำงานของ DNA polymerase ที่อุณหภูมิห้อง ดังนั้นระบบปฏิกิริยาจึงสามารถดำเนินการและสร้างสูตรที่อุณหภูมิห้องเพื่อป้องกันการไม่เกิดปฏิกิริยา - การขยายสัญญาณเฉพาะและปรับปรุงประสิทธิภาพปฏิกิริยา และเวอร์ชันนี้สามารถไลโอฟิไลซ์ได้นอกจากนี้ กิจกรรมของมันจะถูกปล่อยออกมาที่อุณหภูมิสูง ดังนั้นจึงไม่จำเป็นต้องมีขั้นตอนการเปิดใช้งานแยกต่างหาก

ส่วนประกอบ

Bst DNA polymerase V2 (ปราศจากกลีเซอรอล)(8U/μL)

การใช้งาน

1.การขยายอุณหภูมิแบบไอโซเทอร์มอลของ LAMP

2.ปฏิกิริยาการกระจัดเดี่ยวของสาย DNA

3.การจัดลำดับยีน GC สูง

4.ลำดับดีเอ็นเอระดับนาโนแกรม

สภาพการเก็บรักษา

การขนส่งภายใต้อุณหภูมิ 0°C และเก็บไว้ที่ -25°C~-15°C

คำจำกัดความของหน่วย

หนึ่งหน่วยหมายถึงปริมาณของเอนไซม์ที่รวม dNTP 25 nmol ลงในวัสดุที่ไม่ละลายกรดในเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 65°C

ควบคุมคุณภาพ

1.การทดสอบความบริสุทธิ์ของโปรตีน (SDS-PAGE)-ความบริสุทธิ์ของ Bst DNA polymerase V2 คือ ≥99% กำหนดโดยการวิเคราะห์ SDS-PAGE โดยใช้การตรวจจับ Coomassie Blue

2.Eเอ็นดอนนิวคลีเอสกิจกรรม:การฟักตัวของปฏิกิริยา 50 μL ที่มี Bst DNA polymerase V2 ขั้นต่ำ 8 U พร้อมด้วย 1 μg lamDNA เป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37 ℃ ส่งผลให้ไม่มีการย่อยสลายที่ตรวจพบได้ตามที่กำหนด

3.กิจกรรมเอ็กโซนิวคลีเอส:การฟักตัวของปฏิกิริยา 50 μL ที่มี Bst DNA polymerase V2 ขั้นต่ำ 8 U พร้อมด้วย 1 μg แล -Hind Ⅲ ย่อย DNA เป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37 ℃ ส่งผลให้ไม่มีการย่อยสลายที่ตรวจพบได้ตามที่กำหนด

4.กิจกรรมของนิเคส:การฟักตัวของปฏิกิริยา 50 ไมโครลิตรที่มี Bst DNA polymerase V2 ขั้นต่ำ 8 U พร้อมด้วย pBR322 DNA 1 ไมโครกรัมเป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37°C ส่งผลให้ไม่มีการย่อยสลายที่ตรวจพบได้ตามที่กำหนด

5.กิจกรรมอาร์เนส:การฟักตัวของปฏิกิริยา 50 ไมโครลิตรที่มี Bst DNA polymerase V2 ขั้นต่ำ 8 U พร้อมด้วย MS2 RNA 1.6 ไมโครกรัมเป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37°C ส่งผลให้ไม่มีการย่อยสลายที่ตรวจพบได้ตามที่กำหนด

6.อี. โคไลดีเอ็นเอ:120 U ของ Bst DNA polymerase V2 ได้รับการคัดกรองสำหรับการมีอยู่ของ DNA จีโนมของ E. coli โดยใช้ TaqMan qPCR พร้อมไพรเมอร์เฉพาะสำหรับ E. coli 16S rRNA locusการปนเปื้อน DNA ของจีโนมของ E. coli อยู่ที่ ≤1 สำเนา

ปฏิกิริยาของหลอดไฟ

หมายเหตุ:

1) ก.SYTOTM 16 สีเขียว (25×): ตามความต้องการในการทดลอง สีย้อมอื่นๆ สามารถใช้แทนได้

2)ข.ส่วนผสมไพรเมอร์: ได้มาจากการผสม 20 µ M FIP, 20 µ M BIP, 2.5 µ M F3, 2.5 µ M B3, 5 µ M LF, 5 µ M LB และปริมาตรอื่นๆ

ปฏิกิริยาและสภาวะ

1 × HC Bst V2 Buffer อุณหภูมิในการฟักตัวอยู่ระหว่าง 60°C ถึง 65°C

การปิดใช้งานความร้อน

 80°ซ 20 นาที