Bst 2.0 DNA Polymerase (ปราศจากกลีเซอรอล)
Bst DNA polymerase V2 มาจาก Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I ซึ่งมีกิจกรรม DNA polymerase 5 ′→ 3′ และกิจกรรมการแทนที่สายโซ่ที่แข็งแกร่ง แต่ไม่มีกิจกรรม exonuclease 5 ′→ 3′Bst DNA Polymerase V2 เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเปลี่ยนตำแหน่งของเกลียว, LAMP การขยายอุณหภูมิความร้อนคงที่ (การขยายความร้อนใต้อุณหภูมิแบบพึ่งสื่อกลางแบบลูป) และการหาลำดับอย่างรวดเร็ว
ส่วนประกอบ
| ส่วนประกอบ | HC5005A-01 | HC5005A-02 | HC5005A-03 |
| BstDNApolymerase V2 (ปราศจากกลีเซอรอล)(8U/μL) | 0.2 มล | 1 มล | 10 มล |
| บัฟเฟอร์ 10×HC Bst V2 | 1.5 มล | 2×1.5 มล | 3×10 มล |
| มก4(100 มม.) | 1.5 มล | 2×1.5 มล | 2×10 มล |
การใช้งาน
1.LAMP การขยายอุณหภูมิแบบไอโซเทอร์มอล
2.DNA strand ปฏิกิริยาการกระจัดเดี่ยว
3. การจัดลำดับยีน GC สูง
4.การจัดลำดับดีเอ็นเอระดับนาโนแกรม
สภาพการเก็บรักษา
การขนส่งภายใต้อุณหภูมิ 0°C และเก็บไว้ที่ -25°C~-15°C
คำจำกัดความของหน่วย
หนึ่งหน่วยหมายถึงปริมาณของเอนไซม์ที่รวม dNTP 25 nmol ลงในวัสดุที่ไม่ละลายกรดในเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 65°C
ควบคุมคุณภาพ
1.การทดสอบความบริสุทธิ์ของโปรตีน (SDS-PAGE)-ความบริสุทธิ์ของ Bst DNA polymerase V2 คือ ≥99% กำหนดโดยการวิเคราะห์ SDS-PAGE โดยใช้การตรวจจับ Coomassie Blue
2.กิจกรรมเอ็กโซนิวคลีเอส:การฟักตัวของปฏิกิริยา 50 μL ที่มี Bst DNA polymerase V2 ขั้นต่ำ 8 U พร้อมด้วย 1 μg แล -Hind Ⅲ ย่อย DNA เป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37 ℃ ส่งผลให้ไม่มีการย่อยสลายที่ตรวจพบได้ตามที่กำหนด
3.กิจกรรมของนิเคส:การฟักตัวของปฏิกิริยา 50 ไมโครลิตรที่มี Bst DNA polymerase V2 ขั้นต่ำ 8 U พร้อมด้วย pBR322 DNA 1 ไมโครกรัมเป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37°C ส่งผลให้ไม่มีการย่อยสลายที่ตรวจพบได้ตามที่กำหนด
4.กิจกรรมอาร์เนส:การฟักตัวของปฏิกิริยา 50 ไมโครลิตรที่มี Bst DNA polymerase V2 ขั้นต่ำ 8 U พร้อมด้วย MS2 RNA 1.6 ไมโครกรัมเป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่ 37°C ส่งผลให้ไม่มีการย่อยสลายที่ตรวจพบได้ตามที่กำหนด
5.อี. โคไล DNA:120 U ของ Bst DNA polymerase V2 ได้รับการคัดกรองสำหรับการมีอยู่ของ DNA จีโนมของ E. coli โดยใช้ TaqMan qPCR พร้อมไพรเมอร์เฉพาะสำหรับ E. coli 16S rRNA locusการปนเปื้อน DNA ของจีโนมของ E. coli อยู่ที่ ≤1 สำเนา
ปฏิกิริยาของหลอดไฟ
| ส่วนประกอบ | 25ไมโครลิตร |
| บัฟเฟอร์ 10×HC Bst V2 | 2.5 ไมโครลิตร |
| มก4 (100 มม.) | 1.5 ไมโครลิตร |
| dNTP (แต่ละอัน 10mM) | 3.5 ไมโครลิตร |
| SYTO™ 16 สีเขียว (25×)a | 1.0 ไมโครลิตร |
| ไพรเมอร์ผสมb | 6 ไมโครลิตร |
| Bst DNA Polymerase V2 (ปราศจากกลีเซอรอล) (8 U/uL) | 1 ไมโครลิตร |
| แม่แบบ | × ไมโครลิตร |
| ddH₂O | มากถึง 25 ไมโครลิตร |
หมายเหตุ:
1) ก.SYTOTM 16 สีเขียว (25×): ตามความต้องการในการทดลอง สีย้อมอื่นๆ สามารถใช้แทนได้
2)ข.ส่วนผสมไพรเมอร์: ได้มาจากการผสม 20 µ M FIP, 20 µ M BIP, 2.5 µ M F3, 2.5 µ M B3, 5 µ M LF, 5 µ M LB และปริมาตรอื่นๆ
ปฏิกิริยาและสภาวะ
1 × HC Bst V2 Buffer อุณหภูมิในการฟักตัวอยู่ระหว่าง 60°C ถึง 65°C
การปิดใช้งานความร้อน
80°C,20นาที
