พรีมิกซ์โพรบ Multiplex qPCR
หมายเลขแมว: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) เป็นสารละลายเบื้องต้นสำหรับการขยาย PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ 2 เท่า โดยมีความไวและความจำเพาะสูง ซึ่งเป็นสีน้ำเงิน และมีผลต่อการเพิ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์นี้เป็นรีเอเจนต์ผสมล่วงหน้าแบบผสม 2 เท่า ซึ่งช่วยให้เกิดปฏิกิริยา PCR เชิงปริมาณฟลูออเรสเซนต์ได้สูงสุด 4 ปฏิกิริยาในหลุมปฏิกิริยาเดียวผลิตภัณฑ์นี้ประกอบด้วยวิธีแอนติบอดีดัดแปลงพันธุกรรมสำหรับเอนไซม์ Taq ที่สตาร์ทแบบร้อน ซึ่งช่วยเพิ่มความไวและความจำเพาะในการขยายอย่างมากในเวลาเดียวกัน ผลิตภัณฑ์นี้ได้เพิ่มประสิทธิภาพบัฟเฟอร์หลายปฏิกิริยาอย่างล้ำลึก ซึ่งสามารถปรับปรุงประสิทธิภาพการขยายของปฏิกิริยา และส่งเสริมการขยายเทมเพลตที่มีความเข้มข้นต่ำอย่างมีประสิทธิภาพผลิตภัณฑ์นี้สามารถใช้สำหรับการวิเคราะห์จีโนไทป์และการวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบมัลติเพล็กซ์
ข้อมูลจำเพาะ
เริ่มร้อนแรง | สตาร์ทร้อนในตัว |
วิธีการตรวจจับ | การตรวจจับไพรเมอร์โพรบ |
วิธีพีซีอาร์ | คิวพีซีอาร์ |
โพลีเมอเรส | Taq DNA โพลีเมอเรส |
ประเภทของตัวอย่าง | ดีเอ็นเอ |
สภาพการเก็บรักษา
สินค้าจัดส่งพร้อมน้ำแข็งแห้งและสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -25~-15°C ได้นาน 2 ปี
คำแนะนำ
1. ปฏิกิริยาระบบ
ส่วนประกอบ | ปริมาณ (ไมโครลิตร) | ความเข้มข้นสุดท้าย |
2 × TaqMan มัลติเพล็กซ์ qPCR มาสเตอร์มิกซ์ | 12.5 | 1× |
ไพรเมอร์ผสม (10 ไมโครโมล/ลิตร) a | × | 0.1 - 0.5 ไมโครโมล/ลิตร |
โพรบผสม (10 ไมโครโมล/ลิตร)b | × | 50 - 250 นาโนโมล/ลิตร |
สีย้อมอ้างอิง Rox | 0.5 | 1× |
เทมเพลต DNA/cDNA | 1-10 | - |
ddH2O | มากถึง 25 | - |
หมายเหตุ:ผสมให้เข้ากันก่อนใช้เพื่อหลีกเลี่ยงไม่ให้เกิดฟองมากเกินไปจากการเขย่าแรงๆ
ก.ความเข้มข้นของไพรเมอร์: ไพรเมอร์มิกซ์ประกอบด้วยไพรเมอร์หลายคู่ โดยปกติแล้วไพรเมอร์แต่ละตัวจะมีความเข้มข้นสุดท้ายที่ 0.2 ไมโครโมล/ลิตร และยังสามารถปรับได้ระหว่าง 0.1 ถึง 0.5 ไมโครโมล/ลิตร ตามความเหมาะสม
ข.ความเข้มข้นของโพรบ: โพรบผสมประกอบด้วยโพรบหลายตัวที่มีสัญญาณเรืองแสงต่างกัน และความเข้มข้นของโพรบแต่ละตัวสามารถปรับได้ระหว่าง 50 ถึง 250 นาโนโมล/ลิตร ตามสถานการณ์เฉพาะ
1.ข้อมูลอ้างอิงสีย้อม Rox:ใช้กับเครื่องมือขยาย PCR แบบเรียลไทม์ เช่น Applied Biosystems เพื่อแก้ไขข้อผิดพลาดของสัญญาณเรืองแสงที่สร้างขึ้นระหว่างหลุมผลิตภัณฑ์นี้ไม่มีการอ้างอิงสีย้อม Roxแนะนำให้ใช้ Cas#10200 หากจำเป็น
2.การเจือจางเทมเพลต: qPCR มีความไวสูงและขอแนะนำให้เจือจางเทมเพลตเพื่อใช้งานหากเทมเพลตเป็นโซลูชันสต็อค cDNA ปริมาณเทมเพลตไม่ควรเกิน 1/10 ของปริมาณทั้งหมด
3.ระบบปฏิกิริยา: แนะนำให้ใช้ 25μL, 30μL หรือ 50 μL เพื่อให้มั่นใจถึงประสิทธิภาพและความสามารถในการทำซ้ำของการขยายยีนเป้าหมาย
4.การเตรียมระบบ: โปรดจัดเตรียมในม้านั่งที่สะอาดเป็นพิเศษ และใช้ปลายและท่อปฏิกิริยาโดยไม่มีสารตกค้างของนิวคลีเอสขอแนะนำให้ใช้ปลายกับตลับกรองหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามและการปนเปื้อนของละอองลอย
2.โปรแกรมปฏิกิริยา
ขั้นตอนวงจร | อุณหภูมิ. | เวลา | รอบ |
การเสียสภาพเริ่มต้น | 95 ℃ | 5 นาที | 1 |
การเสียสภาพ | 95 ℃ | 15 วินาที | 45 |
การหลอม/การขยาย | 60 ℃ | 30วินาที |
หมายเหตุ:
1-การหลอม/การยืดตัว: สามารถปรับอุณหภูมิและเวลาได้อย่างเหมาะสมตามค่า Tm ของไพรเมอร์ที่ออกแบบไว้
2.การได้มาของสัญญาณฟลูออเรสเซนซ์: ระยะเวลาในการได้รับสัญญาณฟลูออเรสเซนซ์ที่จำเป็นสำหรับเครื่องมือตรวจจับ qPCR ที่แตกต่างกันนั้นแตกต่างกัน โปรดตั้งค่าตามขีดจำกัดเวลาขั้นต่ำเวลาของตราสารทั่วไปหลายอย่างมีการตั้งค่าดังนี้:
20 วินาที: Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 รวดเร็ว
31 วินาที: ประยุกต์ไบโอซิสเต็มส์ 7300
32 วินาที: ประยุกต์ไบโอซิสเต็มส์ 7500
หมายเหตุ
โปรดสวมชุด PPE ที่จำเป็น เสื้อกาวน์และถุงมือดังกล่าว เพื่อสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ!