Multiplex One Step RT-qPCR พรีมิกซ์-UNG
หมายเลขแมว: HCB5145A
ชุดโพรบ Multiplex One Step RT-qPCR (UDG Plus) คือชุด PCR เชิงปริมาณแบบมัลติเพล็กซ์ที่ใช้ RNA เป็นเทมเพลตในกระบวนการของการทดลอง จะมีการถอดรหัสแบบย้อนกลับและ PCR เชิงปริมาณในหลอดเดียวกัน ซึ่งช่วยให้การดำเนินการทดลองง่ายขึ้นและลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนในชุดอุปกรณ์นี้ cDNA เส้นแรกได้รับการสังเคราะห์อย่างมีประสิทธิภาพโดย Reverse Transcriptase ที่ทนความร้อน และขยายเชิงปริมาณโดย HotStart Tag DNA Polymeraseชุดนี้ส่วนใหญ่ประกอบด้วยบัฟเฟอร์ MP ที่ปรับให้เหมาะสม ส่วนผสมของเอนไซม์ ฯลฯ สารละลายบัฟเฟอร์มี Mg อยู่แล้ว2+และดีเอ็นทีพีนอกจากนี้ ยังมีการเพิ่มปัจจัยที่สามารถยับยั้งการขยาย PCR ที่ไม่เฉพาะเจาะจงได้อย่างมีประสิทธิภาพและปรับปรุงประสิทธิภาพการขยายของปฏิกิริยา qPCR หลายรายการ ซึ่งสามารถรับประกันประสิทธิภาพการขยายและดำเนินการได้ถึงปฏิกิริยาการขยายหลายรายการมีการเพิ่มระบบ dUTP/UDG เพื่อป้องกันความเสี่ยงของการปนเปื้อนของละอองลอยอย่างมีประสิทธิภาพ
ส่วนประกอบ
1. บัฟเฟอร์
2. เอนไซม์ผสม
ข้อมูลจำเพาะ
| เริ่มร้อนแรง | สตาร์ทร้อนในตัว |
| วิธีการตรวจจับ | การตรวจจับไพรเมอร์โพรบ |
| วิธีพีซีอาร์ | RT-qPCR ขั้นตอนเดียว |
| โพลีเมอเรส | Taq DNA โพลีเมอเรส |
| ประเภทของตัวอย่าง | ดีเอ็นเอ |
สภาพการเก็บรักษา
สินค้าจัดส่งพร้อมน้ำแข็งแห้งและสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -25~-15°C ได้นาน 1 ปีก็ควรหลีกเลี่ยงบ่อยๆแช่แข็งละลายขอแนะนำให้บันทึกแยกกัน
คำแนะนำ
1.ปฏิกิริยา ระบบ
| ส่วนประกอบ | ปริมาณ (ไมโครลิตร) | ความเข้มข้นสุดท้าย |
| บัฟเฟอร์ MP 2 × | 12.5 | 1× |
| เอนไซม์ผสม | 1 | - |
| ไพรเมอร์/โพรบผสม (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| เทมเพลต RNA | 1-10 | - |
| RNase ฟรี H2O | ถึง 25 | - |
หมายเหตุ:
ต้องแน่ใจว่าผสมให้เข้ากันก่อนใช้งาน หลีกเลี่ยงไม่ให้มีฟองมากเกินไปที่เกิดจากการสั่นสะเทือนที่รุนแรง
ก.ความเข้มข้นของไพรเมอร์: ไพรเมอร์ผสมรวมถึงไพรเมอร์มัลติเพล็กซ์ ขึ้นอยู่กับสถานการณ์ ความเข้มข้นของไพรเมอร์ที่เหมาะสมที่สุดอาจอยู่ระหว่าง 0.l ถึง 1.0μM
ข.ความเข้มข้นของโพรบ: การผสมโพรบรวมถึงการติดฉลากโพรบมัลติเพล็กซ์กลุ่มเรืองแสงที่แตกต่างกัน ขึ้นอยู่กับสถานการณ์ ความเข้มข้นที่เหมาะสมของโพรบอาจอยู่ระหว่าง 0.05 ถึง 0.5μM
ค.การเจือจางเทมเพลต: qPCR มีความไวสูงและแนะนำให้เจือจางเทมเพลตค่ากะรัตควบคุมมีความเหมาะสมระหว่าง 20 ถึง 35
ง.การเตรียมระบบ: โปรดจัดเตรียมในโต๊ะทำงานที่สะอาดเป็นพิเศษ และปิเปตและท่อปฏิกิริยาที่ไม่มีสารตกค้างของนิวคลีเอสแนะนำให้ใช้หัวปืนพร้อมไส้กรองหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามและการปนเปื้อนของละอองลอย
2. เพิ่มประสิทธิภาพการปั่นจักรยานมาตรการ
| วงจร ขั้นตอน | อุณหภูมิ | เวลา | รอบ |
| การถอดเสียงแบบย้อนกลับ | 50 ℃ก | 20นาที | 1 |
| การเสียสภาพเริ่มต้น | 95 ℃ | 5 นาที | 1 |
| ปฏิกิริยาการขยาย | 95 ℃ | 15 วินาที |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30วินาที c |
หมายเหตุ:
ก.การถอดเสียงแบบย้อนกลับ: อุณหภูมิสามารถเลือกได้ 42°C หรือ 50°C
ข.ปฏิกิริยาการขยาย: อุณหภูมิจะถูกปรับตามค่า Tm ของไพรเมอร์ที่ออกแบบ
ค.การได้มาของสัญญาณเรืองแสง: โปรดตั้งค่าขั้นตอนการทดลองตามข้อกำหนดของคู่มือเครื่องมือ
หมายเหตุ
โปรดสวมชุด PPE ที่จำเป็น เช่น เสื้อกาวน์และถุงมือ เพื่อสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ
