2×HiF Taq พร้อมมาสเตอร์มิกซ์
หมายเลขแมว: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (พร้อมสีย้อม) เป็นสารละลายผสมล่วงหน้า 2× ที่พร้อมใช้งานซึ่งประกอบด้วย Plus HIF DNA Polymerase, dNTP และบัฟเฟอร์ที่ปรับให้เหมาะสมโมโนโคลนอลแอนติบอดีสองตัวที่อุณหภูมิห้องซึ่งยับยั้งการทำงานของโพลีเมอเรสและกิจกรรม 3′→5′exonuclease จะถูกเพิ่มเข้าไปในส่วนผสมหลักเพื่อให้ Hot Start PCR มีความเฉพาะเจาะจงสูงได้อย่างง่ายดายปัจจัยการขยายจะถูกเพิ่มลงในส่วนผสมหลักเพื่อให้เอนไซม์มีความสามารถในการขยายส่วนยาว ความยาวของการขยายอาจสูงถึง 13 kb เอนไซม์มีกิจกรรม DNA polymerase 5′→3′ และ 3′→5′ กิจกรรม exonuclease ความเที่ยงตรงของมันคือ 83 เท่าของ Taq DNA polymerase ซึ่งเป็น 9 เท่าของ DNA polymerase สามัญเหมาะสำหรับการขยายเทมเพลตที่ซับซ้อน ผลิตภัณฑ์ขยายสัญญาณเป็นแบบปลายทื่อ
2×HIF Taq plus Master Mix (พร้อมสีย้อม) มีข้อดีคือรวดเร็วและง่ายดาย ความไวสูง มีความจำเพาะสูง มีเสถียรภาพที่ดี ฯลฯ ระบบปฏิกิริยาจำเป็นต้องเพิ่มไพรเมอร์และเทมเพลตเท่านั้น และสามารถขยายได้ด้วยสอง- โปรโตคอลขั้นตอน ทำให้ขั้นตอนการทดลองง่ายขึ้นและประหยัดเวลาผลิตภัณฑ์นี้มีสีย้อมบ่งชี้อิเล็กโทรโฟเรซิส และผลิตภัณฑ์ PCR สามารถใช้โดยตรงสำหรับอิเล็กโทรโฟรีซิสนอกจากนี้ ผลิตภัณฑ์ยังมีสารป้องกันเฉพาะ เพื่อให้ส่วนผสมหลักสามารถรักษากิจกรรมที่เสถียรหลังจากการแช่แข็งและละลายซ้ำหลายครั้ง
สภาพการเก็บรักษา
ควรเก็บผลิตภัณฑ์ไว้ที่ -25~-15℃ เป็นเวลา 1 ปี
ข้อมูลจำเพาะ
คุณสมบัติของผลิตภัณฑ์ | มาสเตอร์มิกซ์ |
ความเข้มข้น | 2× |
เริ่มร้อนแรง | ฮอตสตาร์ทในตัว |
ยื่นออกมา | ทื่อ |
ความเร็วของปฏิกิริยา | รวดเร็ว |
ขนาด (ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย) | สูงสุด 13kb |
เงื่อนไขในการขนส่ง | น้ำแข็งแห้ง |
ประเภทสินค้า | พรีมิกซ์ PCR ความเที่ยงตรงสูง |
คำแนะนำ
1.ระบบปฏิกิริยา PCR
ส่วนประกอบ | ปริมาณ (ไมโครลิตร) |
แม่แบบดีเอ็นเอ | เหมาะสม |
ฟอร์เวิร์ดไพรเมอร์ (10 ไมโครโมล/ลิตร) | 2.5 |
รีเวิร์สไพรเมอร์ (10 ไมโครโมล/ลิตร) | 2.5 |
2×HIF Taq บวกมาสเตอร์มิกซ์ | 25 |
ddH2O | ถึง 50 |
2.แนะนำการใช้เทมเพลตต่างๆ
ประเภทของเทมเพลต | ขยายแฟรกเมนต์จาก 1kb เป็น 10 kb |
จีโนมดีเอ็นเอ | 50ng-200ng |
พลาสมิดหรือ DNA ของไวรัส | 10pg-20ng |
ซีดีเอ็นเอ | 1-2.5 ไมโครลิตร (ไม่เกิน 10% ของปริมาตรปฏิกิริยา PCR สุดท้าย) |
3.โปรโตคอลการขยาย
1) โปรโตคอลสองขั้นตอน (เทมเพลตความซับซ้อน)
ขั้นตอนวงจร | อุณหภูมิ | เวลา | รอบ |
การเสียสภาพเบื้องต้น | 98 ℃ | 3 นาที | 1 |
การเสียสภาพ | 98 ℃ | 10 วินาที | 30-35 |
ส่วนขยาย | 68 ℃ | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
ส่วนขยายสุดท้าย | 72 ℃ | 5 นาที | 1 |
2) โปรโตคอลสามขั้นตอน (โปรโตคอลปกติ)
ขั้นตอนวงจร | อุณหภูมิ | เวลา | รอบ |
การเสียสภาพเบื้องต้น | 98 ℃ | 3 นาที | 1 |
การเสียสภาพ | 98 ℃ | 10 วินาที | 30-35 |
การหลอม | 60 ℃ | 20 วินาที | |
ส่วนขยาย | 72 ℃ | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
ส่วนขยายสุดท้าย | 72 ℃ | 5 นาที | 1 |
3) Annealing Gradient Protocol (เทมเพลตความซับซ้อน)
ขั้นตอนวงจร | อุณหภูมิ | เวลา | รอบ |
การเสียสภาพเบื้องต้น | 98 ℃ | 3 นาที | 1 |
การเสียสภาพ | 98 ℃ | 10 วินาที | 15 (ลดลง 1 ℃ต่อรอบ) |
การหลอมแบบไล่ระดับ | 70-55 ℃ | 20 วินาที | |
ส่วนขยาย | 72 ℃ | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
การเสียสภาพ | 98 ℃ | 10 วินาที |
20 |
การหลอม | 55 ℃ | 20 วินาที | |
ส่วนขยาย | 72 ℃ | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
ส่วนขยายสุดท้าย | 72 ℃ | 5 นาที | 1 |
คุณสมบัติภายใต้โปรโตคอลการขยายสัญญาณที่แตกต่างกัน
โปรโตคอลl | สองขั้นตอน | สามขั้นตอน | การหลอมแบบไล่ระดับ |
ข้อมูลจำเพาะ | เร็ว | ปานกลาง | ช้า |
ความจำเพาะ | สูง | ปานกลาง | สูง |
ผลผลิต PCR | ปานกลาง | สูง | ปานกลาง |
อัตราการตรวจจับ | สูง | ปานกลาง | สูง |
หมายเหตุ
โปรดสวมชุด PPE ที่จำเป็น เช่น เสื้อกาวน์และถุงมือ เพื่อสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ!